傅立葉自解卷積是一種解析光譜重疊譜帶的有效方法，可 以提高重合譜帶的分辨率，可用于對(duì)基礎(chǔ)成分進(jìn)行半定量分 析。紅外光譜是評(píng)估絲素蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)變化的基本方法。 其中，酰胺 I( 1600～ 1700 cm－1 ) 區(qū)由與各種次級(jí)結(jié)構(gòu)相對(duì)應(yīng)的 分量重疊而成，這些次級(jí)結(jié)構(gòu)包括無(wú)規(guī)卷曲( random coil) 、α－ 螺旋( α－h(huán)elix) 、β－折疊( β－sheet) 和 β－轉(zhuǎn)角( β－turns) ，對(duì)該 振動(dòng)帶進(jìn)行退卷積和基線校正，再進(jìn)行分峰和擬合，可以量化 絲素蛋白薄膜中各種二級(jí)結(jié)構(gòu)成分的貢獻(xiàn)。YK－RO－B 型實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)，寧波丹斯博頓環(huán)?？萍钾?zé) 任有限公司; YX－18LM 型手提式壓力蒸汽滅菌鍋，江陰濱江 醫(yī)療設(shè)備有限公司; 85－1 型磁力攪拌器，上海梅穎浦儀器儀表 制造有限公司; H1850 型離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有 限公司; DHG－9036A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海精宏實(shí)驗(yàn) 設(shè)備有限公司; 配有衰減全反射附件的傅立葉變換紅外光譜 儀，PerkinElmer Spectrum Frontier。

    為了對(duì)絲素蛋白薄膜中的不同構(gòu)象進(jìn)行指認(rèn)和半定量分 析，本文使用紅外光譜儀自帶軟件，并采用 9 點(diǎn) 法對(duì)退卷積譜線求取。再使用 PeakFit 4. 2 軟件對(duì)不同退卷積譜線執(zhí)行，設(shè)置 半峰寬為 32. 83，直到迭代次數(shù)減小到不再變化為止。研究發(fā) 現(xiàn)，高斯模型 Gauss Amp 的擬合效果同 Gauss Area，均較好， 相關(guān)性也等同; 而使用其他擬合方程則面臨無(wú)法降低迭代次數(shù) 或相關(guān)性較低等問(wèn)題，不適用于分析本文結(jié)晶度較低的絲素蛋 白薄膜。因此，本實(shí)驗(yàn)選用 Gauss Amp 擬合方程對(duì)所有譜線進(jìn) 行擬合。一般，二階導(dǎo)數(shù)用于驗(yàn)證擬合峰的位置，擬合峰數(shù)目，擬合峰數(shù)目大于等于退卷積峰的數(shù)目。所有譜線采取完全相同的退卷積、二階導(dǎo)或擬合參數(shù)。