精宏鼓風干燥箱對膝骨性關(guān)節(jié)炎家兔關(guān)節(jié)滑膜組

來源：未知發(fā)布日期：2019-09-09 09:39【大中小】

骨性關(guān)節(jié)炎( OA) 是骨傷科最常見的疾病，隨著我國人口老齡化趨勢加速，骨性關(guān)節(jié)炎的患者也逐年增加，其中膝關(guān)節(jié)是骨性關(guān)節(jié)炎最常見最多發(fā) 病的部位。隨著病情發(fā)展，引起的直接后果就是活動受限，喪失勞動力，嚴重者可導(dǎo)致殘廢。蒙藥森登－ 4 味湯由文冠木、訶子、梔子、川楝子等藥味組成，有著清熱燥黃水的功能，主治痛風、痹病、關(guān) 節(jié)黃水病、關(guān)節(jié)水腫等，在臨床上廣泛用于治療關(guān) 節(jié)炎及水腫等病癥。

1 材料

1. 1 動物

健康成年家兔 70 只，清潔級，雌雄不限，體質(zhì)量( 2. 5 ± 0. 2) kg，由長春億斯實驗動物技術(shù)有限公司提供，實驗動物許可證號: SCXK( 吉) 2016 － 001。適應(yīng)性喂養(yǎng) 1 周。

1. 2 藥品與試劑

森登－ 4 味湯: 由文冠木、訶子、梔子、川楝子等藥味組成，內(nèi)蒙古民族大學附屬醫(yī) 院制劑室制備成散劑，加 50 mL 蒸餾水制成混懸液備用。白介素－ 1β、腫瘤壞死因子－ α、轉(zhuǎn)化生長因子－ βELISA 檢測試劑盒: 上海源葉生物技術(shù)有限公司; 戊巴比妥鈉: 上?；瘜W試劑有限公司。

1. 3 主要儀器

AUY － 120 電子天平( max 201g d = 0. 01mg) : 日本島津公司; TG16 － WS 臺式離心機: 長沙湘瑞離心機有限公司; DY89 － 1 電動勻漿機: 寧波電子科技有限公司; Sunrise M7. 2 型多功能酶標儀: 美國 Molecular Devices; 上海精宏DHG-9140A恒溫干燥箱: 上海精宏實驗設(shè)備有限公司; 冰箱: 青島海爾公司。

2 方法

80 只成年家兔恒溫恒濕條件下適應(yīng)性喂養(yǎng) 7 d 后，隨機選取 64 只家兔采用改良 Hulth 法進行動物模型制造，其余 16 只做正常對照組。實驗家兔稱重，編號，用 30 g /L 戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉( 30 mg / kg) 后，將兔固定于手術(shù)臺上，雙膝伸直位。常規(guī)剃毛、消毒、鋪巾。于兔右側(cè)膝關(guān)節(jié)髕內(nèi)側(cè)作長約 2. 5 cm 的縱行皮膚切口，切斷內(nèi)側(cè)副韌帶，完整摘除內(nèi)側(cè)半月板，切斷前交叉韌帶。建模時注意保護關(guān)節(jié)軟骨面不受損傷; 徹底止血，逐層縫合，常規(guī)消毒包扎。術(shù)后 1 周肌注青霉素 40 萬 U / d，以防感染。之后進行每天 3 次驅(qū) 趕，每次驅(qū)趕時間至少 30 min，4 周后經(jīng)檢查關(guān)節(jié)軟骨面粗糙、軟骨外觀呈灰黃色、無正常透明度及光澤可見明顯缺損及骨贅形成，顯示動物模型制造成功。將成模大鼠隨機分為 4 組，模型組和森登－ 4 味湯高( 45 mg / kg) 、中( 30 mg / kg) 、低劑量( 15 mg / kg) 組，每組 16 只，各組給予相應(yīng)計量灌胃給藥，模型組、正常組蒸餾水灌胃，每天 1 次，連續(xù)給藥 28 d。末次給藥后 24 h，處死( 空氣栓塞法) 家兔，在無菌條件下，用剪刀自股骨下段及脛骨上段分別剪取完整膝關(guān)節(jié)，切開關(guān)節(jié)，顯露膝關(guān)節(jié)腔，肉眼觀察關(guān)節(jié)軟骨的顏色、光澤、光滑度、滑膜充血腫脹等情況，然后取關(guān)節(jié)滑膜組織，進行組織勻漿，用酶聯(lián)免疫法檢測白細胞介素( IL － 1β) 、腫瘤壞死因子( TNF － α) 、轉(zhuǎn)化生長因子( TGF － β) 含量，操作嚴格按試劑盒說明進行。

3 結(jié)果

正常對照組家兔隨飼養(yǎng)時間的增長，精神狀態(tài)良好，被毛光澤，行動自如，無異常狀態(tài)。造模成功家兔精神萎靡，不喜活動，進食及飲水量均減少，被毛干枯且無光澤，活動量明顯減少; 膝關(guān)節(jié)出現(xiàn)輕微的炎癥反應(yīng)及關(guān)節(jié)部位出現(xiàn)腫脹，陸續(xù)出現(xiàn)出現(xiàn)關(guān)節(jié)全部水腫且伴有關(guān) 節(jié)活動功能障礙情況，出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫和軟組織腫脹，隨之逐漸消退，關(guān)節(jié)部位僵硬，活動明顯受限，不愛活動。森登－ 4 味湯給藥組較模型組病情有所好轉(zhuǎn)，進食及飲水均增加，體質(zhì)量有所增加，精神狀態(tài)良好，被毛變光澤，行動轉(zhuǎn)好。

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