D-阿洛酮糖是白色的粉末狀晶體,無(wú)臭并且不易吸 潮,易溶于水,其甜度可以代替蔗糖作為Ⅱ型糖尿病人 的甜味劑和膳食補(bǔ)充劑。D-阿洛酮糖具有預(yù)防保護(hù)神經(jīng)、 治療神經(jīng)變性的作用。其熱量低,可以有效抑制血脂和 血糖的升高,具有調(diào)節(jié)血糖穩(wěn)定等特殊功能,是近幾年 來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種具有特殊保健功能胞內(nèi)產(chǎn)物。BSA124S電子天平:賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公 司DK-8D電熱恒溫水槽:上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;Applied BiosystemsTM VeritiTM 96 孔熱循環(huán)儀、Applied BiosystemsTM MiniAmpTM熱循環(huán)儀:賽默飛世爾科技(中國(guó))有限 公司;Z326K高速離心機(jī):德國(guó)Hemeus公司;D3024 臺(tái)式高 速微量小型離心機(jī):大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器(北京)有限公司; DYY-12核酸電泳儀:北京六一生物科技有限公司;JY300C 蛋白質(zhì)電泳儀:北京君意東方電泳設(shè)備有限公司;ZQZY-70BS 振蕩培養(yǎng)箱。
為 驗(yàn) 證pET-20b-DPE1、pET-20b-DPE2、pET-20b-DPE3 在E. coli BL21(DE3)中是否正確表達(dá),對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)破碎后 的重組大腸桿菌細(xì)胞進(jìn)行十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝 膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)檢測(cè)分析結(jié)果,發(fā)酵后 的重組大腸桿菌在32 kDa左右處有目的條帶,與目的蛋白 的分子質(zhì)量一致,SDS-PAGE結(jié)果證明了D-阿洛酮糖3-差 向異構(gòu)酶DPE1、DPE2和DPE3在E. coli BL21(DE3)中均已 正確表達(dá)。幾乎不消耗酮糖,質(zhì)量濃度保持在54 g/L左右,而 經(jīng)24 h 轉(zhuǎn)化后,D-果糖質(zhì)量濃度降低至7.71 g/L,D-阿洛酮 糖的質(zhì)量濃度則由初始的28.33%提高至87.54%,D-果糖 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化后的D-果糖率達(dá)到94.22%。